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在分子診斷領(lǐng)域，如何為檢測方法提供穩(wěn)定、可控、且與真實(shí)病原體特性高度相似的質(zhì)控材料，一直是行業(yè)的挑戰(zhàn)。
ZeptoMetrix 團(tuán)隊(duì)研發(fā)了一種創(chuàng)新的類噬菌體顆粒（Phage-like Particles, PLPs）技術(shù)，可將特定 RNA 病毒的基因片段封裝其中，作為分子檢測的質(zhì)控品。該方法使用重組質(zhì)粒表達(dá)系統(tǒng)與噬菌體外殼蛋白融合標(biāo)簽技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了快速生產(chǎn)、純化和精確定量，并在 2–8°C 下保持長期穩(wěn)定性。
這種技術(shù)已在 SARS-CoV-2 與流感 A 病毒的質(zhì)控開發(fā)中取得突破進(jìn)展，為臨床與科研檢測提供了更高質(zhì)量、更安全的標(biāo)準(zhǔn)化解決方案。
研究摘要：
本研究旨在開發(fā)一種創(chuàng)新的分子診斷質(zhì)控材料——重組類噬菌體顆粒（Phage-like Particles, PLPs），用于封裝特定 RNA 病毒基因片段，以滿足核酸檢測中對穩(wěn)定、安全、高度模擬真實(shí)樣本的質(zhì)控需求。研究團(tuán)隊(duì)基于 pZMCPLP 載體系統(tǒng)，在 E. coli BL21 菌株中利用 T7 啟動子驅(qū)動的雙表達(dá)系統(tǒng)，同時(shí)表達(dá)噬菌體外殼蛋白與成熟蛋白（融合 His 標(biāo)簽），并通過自組裝形成封裝目標(biāo) RNA 的類噬菌體顆粒。
生產(chǎn)流程包括自動誘導(dǎo)培養(yǎng)、超聲裂解、核酸酶處理、親和層析純化（TALON 鈷柱）、SDS-PAGE 與 Western Blot 鑒定、透射電子顯微鏡成像，以及數(shù)字滴度 PCR 定量分析。
結(jié)果表明，所制備的 MS2 類噬菌體顆粒在 2–8°C 條件下可長期穩(wěn)定（實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證至數(shù)百天），且能精準(zhǔn)提供不同拷貝數(shù)濃度（5×10?、1×10?、1×1010 cp/mL）的 RNA 質(zhì)控品。該方法不僅簡化了 PLP 的生產(chǎn)流程，還通過融合 His 標(biāo)簽的成熟蛋白實(shí)現(xiàn)了快速、簡便的純化步驟。
這一成果為分子診斷領(lǐng)域提供了高穩(wěn)定性、可定制化、非傳染性的 RNA 質(zhì)控材料，可廣泛應(yīng)用于新發(fā)傳染病檢測、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制以及體外診斷試劑研發(fā)。
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